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友康恒业生物科技(北京)有限公司

国内的无血清培养基生产企业。有免疫(CIK)、NK细胞、间充质...

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免疫细胞无血清培养基(CIK)
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产品: 浏览次数:2695免疫细胞无血清培养基(CIK) 
品牌: 友康
产品型号: NC0101
产品规格: 1000ml/瓶
保存温度: 2-8℃
最小起订量:
供货总量:
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
有效期至: 长期有效
最后更新: 2023-04-03 10:24
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详细信息
 【免疫细胞无血清培养基(CIK)   用途与描述 】

免疫细胞无血清培养基,用于脐带血或外周血中分离到的单核细胞向CIK细胞(细胞因子诱导的杀伤细胞)的体外诱导及体外大规模扩增培养。

【免疫细胞无血清培养基(CIK)    规格与保存 】

2L培养体系免疫细胞无血清培养基套装:适用于50mL外周血的样本量,使用2L培养基。

产品名称

描述

规格

保存条件

保存期限

免疫细胞无血清培养基(CIK)

免疫细胞体外培养

1000mL/瓶*2

2-8℃保存

12个月

CIK细胞诱导因子试剂盒

YC001起始培养时添加

1支

-20℃保存

YC002接种24h后添加

1支

YC003接种24h后添加

1支

YC004接种24h后添加

1支

YC005添加至培养基中使用,1支/L

2支

3L培养体系免疫细胞无血清培养基套装:适用于100mL外周血的样本量,使用3L培养基。

产品名称

描述

规格

保存条件

保存期限

免疫细胞无血清培养基(CIK)

免疫细胞体外培养

1000mL/瓶*3

2-8℃保存

12个月

CIK细胞诱导因子试剂盒

YC001起始培养时添加

1支

-20℃保存

YC002接种24h后添加

1支

YC003接种24h后添加

1支

YC004接种24h后添加

1支

YC005添加至培养基中使用,1支/L

3支

【免疫细胞无血清培养基(CIK)  使用方法】

1、采集与分离外周血
采集外周血,Ficoll密度梯度离心分离收集单个核细胞。

2、单个核细胞的接种与诱导活化
1) 0d时,绷胞计数。按细胞密度2x106cell/mL接种至对应体积的培养液中。
    添加诱导因子YC001一支。添加10%比例的自体血浆。
2) 1d时(24小时),添加诱导因子YC002、YC003、YC004至已经接种细胞的培养液中。
    将YC005添加至未经使用的培养基中,待用。

3、细胞的连续培养与扩增
1) 3d时,补入新鲜培养液,调整细胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同时添加新加入培养液体积10%比例的自体血浆。补液比例大致在1:2左右(原有培养液体积:新加培养液体积)
2) 5d时,补入新鲜培养液,调整细胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。补液比例大致在1:3左右。
3) 7d时,补入新鲜培养液,调整细胞密度至(06-08)x106cell/mL。补液比例大致在1:2左右。
4) 9d时,将剩余培养液全部加入。

4、收获细胞
培养周期结束后,依据细胞量收获细胞。

【供参考的补液程序范围】

2L培养体系补液体积示意表:50mL外周血,接种密度2.0×106 cell/mL。

天数 操作方式 原有培养液体积/mL 新加培养液体积/mL 培养液总体积/mL 血浆添加/mL 因子添加 备注
0d 接种 0 25 25 2.5 YC001 T75瓶
1d 诱导         YC002、YC003、YC004  
3d 补液 25 50 75 5   换瓶、T175瓶
5d 补液 75 225 300     转培养袋,平分两袋
7d 补液 300 700 1000     每袋补350mL
9d 补液 1000 1000 2000     每袋补500mL

 备注:
1)补液后密度区间为(0.6-0.8)x106cell/mL。若按体积补液与密度区间有冲突的话,请以密度区间为准。
2)纯粹按固定体积接种与补液并非不可,但应建立在丰富的样本量基础之上。
3)外周血量少于50mL,应使用的补液程序,请联系本公司免费索取。 


【免疫细胞无血清培养基(CIK)   产品性能】

1. 细胞总数:125亿,折合62.5亿/L。

免疫细胞无血清培养基培养的细胞的数量增长曲线.jpg

2、CD3+CD56+阳性率在25%-55%

免疫细胞无血清培养基培养的细胞的流式检测数据.jpg

 

3. 细胞支持密度更高。
培养14天后,细胞密度可至5.7×106cell/mL。 培养15天后,细胞密度可至6.2×106cell/mL。

免疫细胞无血清培养基培养的细胞的密度.jpg

4. 培养后期补液结束后,细胞维持能力更强。
一次补液(9d),持续至17天,细胞数量一直维持增长,未见明显下降。

免疫细胞无血清培养基培养的细胞的维持能力.jpg

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